ELISA

Daripada Ujian ELISA adalah pemeriksaan makmal perubatan yang menghasilkan reaksi antigen-antibodi yang disebut. Antigen yang berbeza yang berperanan dalam perubatan manusia atau veterinar boleh diuji. Di Jerman, hanya institusi makmal bertauliah yang ditugaskan untuk menjalankan ujian ini.

Apa itu prosedur?

Ujian ELISA adalah salah satu kaedah imunologi yang disebut dalam ujian makmal perubatan. Prosedur ujian dapat digunakan untuk mengesan molekul protein dalam pelbagai jenis cairan tubuh.

ELISA adalah singkatan untuk Ujian Penyerap Immuno Enzyme Linked. Oleh itu, ia adalah nama berbahasa Inggeris, tetapi telah digunakan dalam penggunaan perubatan Jerman.

Ujian ELISA adalah salah satu kaedah imunologi yang disebut dalam ujian makmal perubatan. Prosedur ujian dapat digunakan untuk mengesan molekul protein dalam pelbagai jenis cairan tubuh. Pengesanan molekul ini pada gilirannya memungkinkan kesimpulan dibuat mengenai penyakit tertentu atau gambar klinikal, sebab itulah doktor juga membuat diagnosis mereka bergantung pada hasil ujian ELISA seperti itu. Oleh itu, prosedur ujian sangat penting dalam amalan klinikal setiap hari, pesakit luar atau pesakit dalam.

Cecair tubuh yang sesuai, misalnya darah utuh atau cairan dari sendi, dihantar terus ke makmal setelah diambil dari pesakit. Sampel biasanya sangat mendesak, kerana bahan asli dianggap sensitif dan harus diperiksa secepat mungkin. Sampel yang dilapisi boleh menyebabkan hasil negatif palsu kerana protein patologi yang akan dikesan telah dikurangkan atau dipecahkan sepenuhnya. Pra-analisis yang disebut memainkan peranan penting dalam ELISA; hasil yang mencurigakan atau negatif harus diulang lagi sekiranya terdapat gejala klinikal.

Fungsi, kesan & matlamat

Tabung uji dan plat mikrotiter yang disebut adalah penting untuk ujian yang betul di makmal perubatan yang bertauliah. Plat ini dengan lekukan separa cekung yang diperbuat daripada plastik khas dan masing-masing dilapisi dengan antibodi yang sangat spesifik.

Sekiranya antigen yang akan dikesan ada dalam cairan tubuh yang akan diperiksa, reaksi antigen-antibodi tertentu berlaku sesuai dengan prinsip kunci dan kunci. Kakitangan makmal boleh memasukkan bahan sampel ke dalam piring sama ada menggunakan pipet secara manual atau secara automatik sepenuhnya. Di institusi makmal perubatan moden hanya sistem automatik sepenuhnya yang digunakan untuk menjalankan diagnostik ELISA.

Walau bagaimanapun, ini mesti dipantau oleh kakitangan terlatih, pembantu makmal perubatan-teknikal. Kawalan kualiti dalaman dan luaran yang disebut juga merupakan tanggungjawab kakitangan makmal, yang diawasi oleh kakitangan perubatan untuk perubatan makmal, epidemiologi jangkitan dan mikrobiologi. Setelah percubaan pertama, iaitu setelah bahan dimasukkan ke dalam plat, antigen spesifik dalam sampel, jika ada, sudah terikat pada antibodi pada plat plastik.

Ini diikuti dengan siklus pencucian dengan larutan garam fisiologi untuk menghilangkan faktor-faktor yang mengganggu seperti antigen atau protein yang tidak diingini dari kumpulan tersebut. Langkah ini sangat penting untuk mengelakkan reaksi positif yang salah. Hasil yang dikatakan positif yang disalahtafsirkan oleh makmal boleh dalam keadaan tertentu membawa akibat yang membawa maut kepada pesakit. Pada langkah kedua penyelidikan, antibodi selanjutnya, yang dihubungkan dengan enzim, ditambahkan. Antibodi berlabel ini juga mengikat antigen.

Pada langkah ketiga dan terakhir, pewarna khas ditambahkan dalam jumlah yang ditentukan, yang dipecah ke tahap yang lebih besar atau lebih sedikit oleh sisa enzim yang tersisa. Hanya enzim yang dapat dipecah yang sebelumnya tidak terikat dengan antigen bersama dengan antibodi. Enzim bebas mampu memecahkan pewarna tambahan. Jumlah tepat pewarna split dapat ditentukan dengan kaedah makmal perubatan selanjutnya, yang disebut fotometri. Ini memungkinkan kesimpulan yang tepat untuk dibuat sama ada dan berapa banyak antigen yang terdapat dalam bahan sampel.

Ujian ELISA tidak hanya digunakan untuk diagnosis awal atau untuk membuktikan diagnosis yang disyaki dalam penyakit tertentu dan gambar klinikal, tetapi juga untuk memantau perkembangannya. Sekiranya kepekatan antigen dalam ujian menjadi lebih rendah semasa terapi, terapi tersebut dianggap berjaya.

Anda boleh mendapatkan ubat anda di sini

➔ Ubat untuk menguatkan sistem pertahanan dan ketahanan badan

Risiko, kesan sampingan & bahaya

Ujian ELISA sangat bermaklumat melalui pengesanan struktur antigen dalam cecair badan. Ujian ini membolehkan pernyataan yang disebut kualitatif, tetapi juga semikuantitatif dan kuantitatif mengenai anggapan adanya antigen tertentu dalam cecair badan.

Darah utuh tidak dapat digunakan untuk pemeriksaan, hanya serum darah. Oleh itu, ujian langsung pada pesakit, misalnya dari darah kapilari di hujung jari, tidak seperti mana-mana ujian serologi yang lain. Dalam perubatan manusia, ujian ELISA terutama digunakan untuk mengesan antigen pada jangkitan bakteria, virus atau kulat. Sebagai tambahan, semua hasil positif serologi hepatitis diperiksa lagi dengan ujian ELISA sebagai standard.

Hormon tertentu, seperti hormon kehamilan HCG, juga dapat ditentukan dengan ujian ELISA. Sekiranya terdapat komplikasi tertentu semasa kehamilan, pengetahuan yang tepat mengenai kepekatan hormon kehamilan dalam darah sangat membantu dalam diagnostik dan terapi. Satu lagi petunjuk untuk ujian adalah pengesanan paraprotein yang disebut dalam air kencing, kerana ia berlaku, misalnya, dalam pelbagai penyakit tumor seperti myeloma berganda.

Ujian ELISA masih dijalankan di banyak institut makmal hari ini, tetapi dianggap ketinggalan zaman oleh pakar. Reaksi imun yang berkaitan dengan enzim dalam ujian ELISA semakin diganti dalam beberapa tahun kebelakangan ini oleh antibodi berlabel radioaktif yang memberikan hasil kuantitatif yang lebih baik. Ujian ini juga dikenali sebagai RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Perkembangan lanjut ELISA yang lebih spesifik adalah kaedah kimia ringan seperti luminescence atau fluorescence.